操作人員使用Elisa試劑盒前的操作須知介紹
點(diǎn)擊次數(shù):511 更新時(shí)間:2022-06-27
Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),往預(yù)先包被GSH捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌,用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成較終的黃色,顏色的深淺和樣品中的GSH呈正相關(guān),用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
Elisa試劑盒的操作須知:
1.分析前質(zhì)控
① 特色 :在固相外表組裝免疫活性物質(zhì)形成“免疫吸附劑”;
② 酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì),進(jìn)行信號(hào)擴(kuò)大;
③ 有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程;
④ 靈敏度特異性相對(duì)較高;
⑤ 局限性:只能檢測(cè)到ng;
⑥ 精密度差(批內(nèi)CV15-20%);
⑦ 線性規(guī)模窄(一個(gè)數(shù)量級(jí));
⑧ 存在"HD-HOOK"效應(yīng)。
2.試驗(yàn)檢測(cè)人員需經(jīng)過培訓(xùn),把握這幾方面的技術(shù)知識(shí):
① 檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理;
② 臨床意義;
③ 熟悉檢測(cè)技巧,了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn);
④ 熟悉檢測(cè)試劑功能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);
⑤ 熟悉檢測(cè)儀器的原理及功能;
⑥ 把握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量操控知識(shí);
⑦ 某些特別項(xiàng)目的檢測(cè)如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。