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小鼠ELISA試劑盒測定系統的表達
點擊次數:931 更新時間:2018-10-25

      小鼠ELISA試劑盒測定小分子量物質常用競爭法,其標準曲線中吸光度與受檢物質的濃度呈負相關。標準曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。注意橫坐標為對數關系,這更有利于測定系統的表達。


、血清


血清是常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。

     用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

     ELSIA試劑盒采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質,在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導致檢測的不準確性。同時也應避免細菌污染,因為菌體內可能含有內源性的HRP從而導致檢測的假陽性。

2、血漿


    用含抗凝劑的或離心管采集血液標本,標本采集后30min內4℃000×g離心5min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

     常用的抗凝劑為EDTA、和等,檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。

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