HCT116+LUC人結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞介紹

HCT116是1979年M.Brattain等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞之一。 在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆。HCT116在無胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮樣的腫瘤。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶luc基因。

細(xì)胞特性

1） 來源：結(jié)直腸癌

2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)

3） 含量：>1×10? 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： BLC-1/CXCL13 ELISA Kit

Mouse osteoprotegerin ligand (OPGL) ELISA Kit 小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)檢測(cè)試劑盒

Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISAKit 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumahyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit人甲狀腺結(jié)合球蛋白

通用型鴨鼠氏菌(ST)試劑盒20次

ELISAKitβ-CG大鼠絨毛膜β

PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 Protein

胃動(dòng)素(MTL)重組蛋白 Recombinant Motilin (MTL)

GGT5重組人 GGT5 / GGTLA1 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein

DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

胃動(dòng)素(MTL)重組蛋白 Recombinant Motilin (MTL)

DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 Protein

NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

GGT5重組人 GGT5 / GGTLA1 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein

HCT116+LUC人結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)檢測(cè)試劑盒

Humanai-apolipoproteinA1aibody,ApoA1ELISAKit 人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAldolase,ALD檢測(cè)試劑盒人縮酶(ALD)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物S腺苷同型半胱核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠黃體生成素（LH）檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠A(CsA)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。